Recombinante Carboxypeptidase B, ≥170 USP units/mg pro.

Recombinante Carboxypeptidase B ≥170 USP units/mg pro.

Recombinante Carboxypeptidase B

Beschrijving

Alvleesklier- of weefselcarboxypeptidase B (CPB), een zeer belangrijk enzym betrokken bij insulineomzetting en hoogst specifiek voor het accijns leggen van de op c-Eindresidu's van Lys en Arg-van peptides en proteïnen, werden uitgedrukt bij op hoog niveau en werden gezuiverd van een recombinante Pichia pastorisspanning. Een cDNA die het varkens alvleesklier- die pro-Carboxypeptidase B (proCPB) bevatten aan het signaal van de de factorenafscheiding van Saccharomyces cerevisiae alpha- wordt werd gesmolten gekloond in de pPIC3K-vector onder controle van P.-pastorisaox1 promotor. Na 72 h van de groei op methanol, procarboxypeptidase B tot 320 mg L−1 wordt geaccumuleerd, die 70% van totale proteïnen in cultuurbovendrijvende substantie die vertegenwoordigen. Één enkel trapsgewijs proces van de ionenuitwisselingsreiniging met q-Sepharose bij stijgende concentraties van ammoniumacetaat stond terugwinning van 65%-procarboxypeptidase B in één enkele fractie toe.  Recombinante Carboxypeptidase B wordt uitgedrukt in E.Coli en door hoge druk vloeibare chromatografie gezuiverd. Er is geen spoor van andere enzym (zoals carboxypeptidase A en chymotrypsin) activiteit. Geen proteaseinhibitors zoals PMSF zijn aanwezig in de voorbereiding.

Fysieke vorm: Gevriesdroogd van 20 mm Tris, pH 8,0 + 50 mm van NaCl.

Voordelen

Dierlijke vrije oorsprong: YaxinBio recombinante behoort carboxypeptidase B tot AOF-niveau 3, elimineert het risico van virusaanwezigheid, of een andere potentiële bijkomende die agenten in dierlijk-afgeleide carboxypeptitase B worden gevonden

Stabiliteit: Steriele recombinante gevriesdroogde carboxypeptidase B elimineert het risico van verontreiniging en vermindert de kansen van activiteitenverlies tijdens vervoer en opslag.

Hoge zuiverheid:

1) Recombinante carboxypeptidase B verstrekt verhoogde specifieke die activiteit en elimineert het vervuilen van proteasenactiviteiten in gehaalde enzymen met lager zuiverheidsniveau worden gevonden.

2) Geen andere vervuilende proteasen zoals chymotrypsin en carboxypeptidase A.

3) Minder dan 10ppm van recombinante trypsine.

Reconstructie

Centrifugeer het flesje voorafgaand aan het openen. Stel in water opnieuw samen aan een concentratie van 0.1-1.0 mg/ml. niet draaikolk. Deze oplossing kan bij 2-8°C maximaal 1 week worden opgeslagen. Voor uitgebreide opslag, wordt het geadviseerd om verder in een buffer te verdunnen die een dragerproteïne (voorbeeld 0.1% BSA) bevatten en opslag in het werk gedeelten bij -20°C aan -80°C.
 

HOOFDLIJNEN

Bron   Recombinant E. coli

Verschijning   Wit of van wit, of geelachtig poeder

Specifieke activiteit   ≥170 units/mg pro.

Zuiverheid (sds-PAGINA)    Kies belangrijke band uit

Molecuulgewicht (sds-PAGINA)   33.8±3.4-kDa

Fysieke Vorm Gevriesdroogd Poeder

Biochemie/physiolacties

Proteasen (ook de genoemd Proteolytic Enzymen, Peptidases, of Proteïnase) zijn enzymen die de amidebanden binnen proteïnen of peptides hydroliseren. Carboxypeptidase-B splijt opeenvolgend C de eindresidu's van K en r-. De recombinante rat carboxypeptidase-B is kDa 35,1 het eiwit bestaan uit 307 aminozuren.